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產品分類信帆生物銷售過氧化氫!
信帆生物專業(yè)提供過氧化氫,產品質量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產品是能夠符合質量標準,適合客戶要求的產品。本產品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測定意義:
H2O2是生物體內常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細胞內核酸,蛋白質等生物大分子,并使細胞膜遭受損害,從而加速細胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應急反應中的關鍵調節(jié)因子,。
測定原理:
H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物,在415nm有特征吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。
試劑的組成和配制:
試劑一:丙酮100mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入3mL濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體×1瓶,4℃保存;
H2O2提取:
1、細菌或細胞樣品的制備:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL試劑一,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2. 組織樣品的制備:稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
注意事項:
1、由于試劑一易揮發(fā),試劑一必須先預冷再加,研磨時必須在冰上研磨。
2、本試劑盒中試劑的揮發(fā)性較高,請帶一次性手套和口罩。
測定步驟
試劑名稱(uL) | 測定 | 對照 |
樣本 | 250 |
|
試劑一 |
| 250 |
試劑二 | 25 | 25 |
試劑三 | 50 | 50 |
4000g,常溫離心10min,棄上清,留沉淀
試劑四 | 250 | 250 |
加入試劑四溶解沉淀后,室溫靜置5min,取200μL轉移至微量石英比色皿或96孔板中測定415nm處吸光值。對照管只要做一次即可。計算ΔA=A測定-A對照。
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